人参炭疽病菌T-DNA突变体库的构建及分析

作者：李美仪; 孙境远; 宋佳龙; 梁池嘉; 丁冠中; 刘宁^*; 刘守安^*

来源：特产研究, 2023, 1-7.

DOI：10.16720/j.cnki.tcyj.2023.207

• 人参炭疽病
• 农杆菌介导转化
• 突变体
• 遗传转化

人参炭疽病主要由人参炭疽病菌(Colletotrichum panacicola)引起，是影响人参栽培产业的重要病害之一。T-DNA插入突变体的构建是研究其致病机理的有效手段。本研究通过对根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的人参生炭疽病菌遗传转化体系进行优化，对影响转化效率的主要因子进行单因子条件试验。结果表明，获得最优转化体系为：抑制人参炭疽病菌孢子的遗传霉素(G418)浓度为100 μg/mL，人参炭疽病菌分生孢子的浓度为105个/mL，农杆菌OD600值为0.9，乙酰丁香酮(AS)浓度为 200 μmol/L，共培养时间为48 h；从人参炭疽病菌T-DNA突变体库中，随机挑选8个转化子进行PCR验证，结果均为阳性；经PDA平板10代培养仍具有G418抗性，验证了T-DNA插入片段的遗传稳定性。本研究优化了农杆菌介导的人参炭疽病菌遗传转化体系，初步构建了人参炭疽病菌T-DNA插入突变体库，为人参炭疽病菌的分子致病机理及有效防治提供理论支撑。

• 单位
  中国农业科学院特产研究所; 吉林大学