摘要
为了研究不同浓度瘦素对绵羊卵泡颗粒细胞的增殖凋亡作用及其作用机制,在发情期采集成年健康绵羊的双侧卵巢,收集卵泡颗粒细胞(GCs)进行培养,通过免疫荧光方法检测和确认所分离的细胞是卵泡颗粒细胞,通过EdU检测添加不同质量浓度瘦素(0、10、25、50、100 ng/m L)对细胞的增殖作用,通过qPCR、Western blotting检测瘦素对卵泡颗粒细胞的作用以及是否通过JAK2/STAT3通路发挥作用。结果表明,添加不同浓度瘦素处理GCs24 h,添加25、50 ng/m L瘦素可促进颗粒细胞增殖;瘦素处理后能增强LEPR、JAK2、Bcl-2基因和LEPR、JAK2、P-STAT3、Bcl-2蛋白的表达,降低BAX基因的表达。不同浓度瘦素对绵羊卵泡颗粒细胞有增殖作用,50 ng/m L作用最佳;瘦素通过与受体相互作用激活JAK2/STAT3通路对绵羊卵泡颗粒细胞发挥抗凋亡作用,可为治疗人类和家畜代谢紊乱导致的低生育力或者不育提供新思路。
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单位动物科学学院; 山西农业大学