褪黑激素对体外培养神经元七氟醚损害的保护作用

作者：石磊; 周银芳; 方圆^*

来源：中国临床神经外科杂志, 2021, 26(05): 354-359.

DOI：10.13798/j.issn.1009-153X.2021.05.012

• 皮质神经元
• 褪黑激素
• miR-130a
• ROCK2
• 七氟醚
• 大鼠乳鼠

目的探讨褪黑激素(MLT)对体外培养神经元七氟醚(SEV)损伤的保护作用及其机制。方法取SD大鼠乳鼠全脑皮层组织,分离皮质神经元进行体外培养;MLT预处理24 h后,4%SEV作用神经元;采用CCK-8法检测神经元存活率,流式细胞术检测神经元凋亡率,qPCR检测神经元miR-130a-3p和ROCK2 mRNA水平;免疫印迹法检测凋亡相关蛋白表达;应用在线预测软件TargetScan分析预测miR-130a-3p与ROCK2靶向关系并验证。结果 SEV明显降低神经元存活率以及miR-130a-3p和ROCK2 mRNA水平(P<0.05),明显增加神经元凋亡率及凋亡相关蛋白cle-caspase3和cle-caspase9表达水平(P<0.05);MLT明显抑制SEV的作用(P<0.05)。软件TargetScan分析显示,miR-130a-3p与ROCK2的3’非编码区第846～852碱基处存在结合位点,PCR和免疫印迹法检测显示,miR-130a-3p与ROCK2存在靶向关系。ROCK2过表达明显逆转MLT预处理的效果(P<0.05)。结论MLT预处理明显改善SEV对体外培养的大鼠乳鼠皮质神经元的损害,机制可能是上调miR-130a,进而靶向抑制ROCK2表达。

• 单位
  安康市中心医院; 安康市人民医院