摘要

目的通过酵母双杂交实验筛选与环指蛋白216(ring finger protein 216, RNF216)相互作用的蛋白, 进一步阐明RNF216在GnRH缺陷疾病中的作用。方法构建pGBKT7-RNF216重组表达载体, 将其转化到Y2HGold酵母中, 与人cDNA文库进行杂交, 筛选与RNF216相互作用的蛋白, 然后在Y2HGold酵母中进行验证。结果成功构建了pGBKT7-RNF216重组表达载体, 并在Y2HGold酵母中成功表达;通过酵母双杂交实验, 筛选到了一个与RNF216相互作用的蛋白——丝状蛋白B(filamin B, FLNB), 并在Y2HGold酵母中验证了它们之间的相互作用。结论成功筛选到一个与RNF216相互作用的FLNB蛋白, RNF216可能通过调节FLNB或FLNB/FLNA异源二聚体影响GnRH神经元的增殖和迁移。

  • 单位
    中南大学湘雅医学院