miR-125b-5p对人血管瘤内皮细胞HemES增殖和凋亡的影响及其机制

作者：王恬^*; 张福林; 赵越; 郭东栋; 杨瑞

来源：中国应用生理学杂志, 2021, 37(03): 247-253.

• miR-125b-5p
• MCL-1
• 血管瘤
• 增殖
• 凋亡

目的:研究miR-125b-5p对人血管瘤内皮细胞Hem ECs增殖、凋亡的影响。方法:RT-q PCR检测人血管瘤内皮细胞Hem ECs及其旁系组织细胞中miR-125b-5p与MCL-1 mRNA的表达;选取Hem ECs细胞分为对照组、miR-NC组、miR-125b-5p mimic组、miR-125b-5p inhibitor组、pc-MCL-1组、miR-125b-5p+pc-MCL-1组,每组设9复孔。将100 nmol·L-1的miR-NC、miR-125b-5p mimic、miR-125b-5p inhibitor、pc-MCL-1质粒分别或联合转染进入Hem ECs细胞。MTT法检测Hem ECs细胞增殖;流式细胞术检测Hem ECs细胞凋亡;双荧光素酶报告检测靶向关系;蛋白印迹法检测Ki67、PCNA、cleaved caspase-3、Bax、Bcl-2、p-p70s6k/p70s6k、p-AKT/AKT、p-m TOR/m TOR蛋白相对表达水平。结果:通过比较miR-125b-5p在血管瘤组织和细胞中的表达水平,选择下调效果比较明显的Hem ECs细胞系进行后续实验。与对照组相比,miR-125b-5p mimic组Hem ECs细胞增殖及Ki67和PCNA表达明显减少(P<0.01),细胞凋亡率及cleaved Caspase-3、Bax表达明显升高、Bcl-2表达明显降低(P<0.01),p-AKT/AKT、pm TOR/m TOR、p-p70S6K/p70S6K表达明显下调(P<0.01);miR-125b-5p inhibitor组Hem ECs细胞增殖及Ki67和PC-NA表达明显增加(P<0.01),细胞凋亡率及cleaved Caspase-3、Bax表达明显降低、Bcl-2表达升高(P<0.05,P<0.01)。miR-125b-5p靶向下调MCL-1。与miR-125b-5p mimic组相比,miR-125b-5p+pc-MCL-1组Hem ECs细胞增殖及Ki67和PCNA表达明显增加(P<0.01),细胞凋亡率及cleaved Caspase-3、Bax表达明显降低、Bcl-2表达明显升高(P<0.01),p-AKT/AKT、p-m TOR/m TOR、p-p70S6K/p70S6K表达明显上调(P<0.01)。结论:miR-125b-5p抑制人血管瘤内皮细胞增殖、诱导细胞凋亡,其机制可能与靶向下调MCL-1表达,抑制AKT/m TOR通路激活等有关。

• 单位
  延安市人民医院