双磁珠法质粒DNA提取技术及应用

作者：喻春函; 宋辉; 曹文刚; 肖晓文^*; 杜军^*

来源：生物工程学报, 2023, 39(11): 4708-4717.

DOI：10.13345/j.cjb.230277

• 质粒提取
• 双磁珠法
• 高通量提取
• 低成本

质粒是基因合成与测序领域中使用最为频繁的基因运载工具，然而传统的质粒DNA提取方法面临提取通量低、生产成本高等问题，无法满足日益增长的需求。本研究基于质粒提取原理，开发了双磁珠法(double-magnetic-bead method, DMBM)质粒提取技术，探究了磁珠投入量、质粒DNA片段大小、菌液投入量等因素对质粒提取的影响，并且对比了本技术与商业化质粒DNA提取试剂盒提取DNA质量、提取通量及提取成本。结果表明，双磁珠法质粒DNA提取技术可满足不同细胞密度、不同片段长度的质粒DNA提取。此外，该技术搭载96通道全自动核酸提取仪，提取的质粒DNA纯度更高、提取时间缩短80%、提取成本缩减57.1%，从而实现了质粒DNA提取的高通量、低成本，有效助力基因合成与测序。