摘要
目的 探讨环指蛋白187(RNF187)在前列腺癌细胞中的表达及其对前列腺癌细胞增殖、侵袭的影响。方法 通过癌症基因组图谱(TCGA)和高通量基因表达(GEO)数据库分析前列腺癌组织和正常组织间RNF187的表达差异,体外培养正常前列腺上皮细胞系RWPE-1和人前列腺癌细胞系LNCaP、C4-2、DU145、PC-3,用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)测定RWPE-1、LNCaP、C4-2、DU145、PC-3中RNF187 mRNA表达水平,蛋白免疫印迹法测定RNF187蛋白表达水平。转染RNF187-siRNA1、RNF187-siRNA2至DU145、PC-3,RT-qPCR测定RNF187 mRNA相对表达量、CCK-8法测定细胞活性,5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(EdU)法测定细胞增殖能力,Transwell小室测定细胞的迁移和侵袭能力,蛋白免疫印迹法检测RNF187和上皮-间充质转化(EMT)标志蛋白及基质金属蛋白酶(MMP-9)的蛋白表达水平。结果 TCGA和GEO数据集中,前列腺癌组织中RNF187表达量均高于正常前列腺组织,Gleason评分及分期较高者的表达量较高(P均<0.05)。人前列腺癌细胞PC-3、LNCaP、C4-2、DU145中RNF187mRNA及蛋白表达均高于正常前列腺上皮细胞RWPE-1(P均<0.01)。RNF187-si1组、RNF187-si2组DU145、PC-3中的RNF187 mRNA相对表达量分别低于Control组的DU145和PC-3中的RNF187 mRNA相对表达量(P均<0.001)。RNF187敲减后,DU145、PC-3细胞增殖活性及增殖、侵袭和迁移能力下降,RNF187、神经钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、MMP-9蛋白相对表达量均降低,上皮钙黏蛋白(E-cadherin)相对表达量升高(P均<0.05)。结论 RNF187在前列腺癌组织中过表达,敲减RNF187可降低前列腺癌DU145、PC-3的细胞增殖活性及增殖、侵袭和迁移能力。
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单位贵州医科大学; 贵州省人民医院