大鼠肝细胞系BRL-3A细胞Hsp70过表达条件的优化

作者:计红; 薛琳琳; 耿仁德; 郭景茹; 臧琳; 王建发; 孔凡志; 齐艳萍; 杨焕民; 郭丽; 蒲丽君
来源:黑龙江畜牧兽医, 2014, (05): 34-38+209.
DOI:10.13881/j.cnki.hljxmsy.2014.0010

摘要

为了使热休克蛋白70(heat shock protein 70,Hsp70)在BRL-3A细胞中过表达,试验以带有标签基因的腺病毒感染BRL-3A细胞,根据感染效率初筛病毒感染的最适浓度和作用时间;然后用初筛出的最适浓度(4×107,2×107,1×107,0.5×107,0.25×107pfu/mL)和时间(24 h和48 h)感染BRL-3A细胞,优化Hsp70重组腺病毒感染BRL-3A细胞的条件,并应用荧光定量RT-PCR和免疫蛋白印记方法检测Hsp70的mRNA和蛋白表达量。结果表明:当用1×107pfu/mL病毒AdCMV-Hsp70按照最佳感染条件的感染复数(MOI)=20感染B...

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