长链非编码RNA GM10786调控miR-142-Nrf2轴抑制糖尿病肾病单核细胞炎性因子分泌的作用及机制研究

作者：黄丽; 袁发焕; 庞琪; 陈吉刚; 杜翔; 冯兵^*

来源：免疫学杂志, 2021, 37(05): 439-445.

DOI：10.13431/j.cnki.immunol.j.20210061

• GM10786
• 糖尿病肾病
• miR-142
• Nrf2
• 炎性因子

目的探讨lncRNA GM10786靶向结合miR-142抑制糖尿病肾病(DN)单核巨噬细胞炎性因子分泌的作用及机制。方法高通量转录芯片筛选DN患者与健康对照者外周血单核细胞差异表达lncRNA。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测高糖刺激下THP-1细胞中GM10786的表达水平。在THP-1细胞中转染Lv-control、Lv-GM10786后,qRT-PCR测定高糖刺激下转染后细胞中pro-IL-1β和TNF-α的表达水平。采用双荧光素酶报告基因实验验证GM10786与miR-142的靶向结合及miR-142靶向调控Nrf2。THP-1细胞中转染空质粒(Control)、miR-142、以及共转染GM10786和miR-142后,qRT-PCR和Western blotting检测Nrf2和HO-1的表达水平, ELISA和Western blotting检测高糖刺激下转染细胞培养上清及细胞中IL-1β和TNF-α的表达水平。结果与健康对照组相比,GM10786在DN患者外周血单核细胞中的表达显著下调(P<0.05)。在高糖刺激下GM10786在THP-1中的表达相较正常培养基也显著下调(P<0.05)。与HG+Lv-control组相比,HG+Lv-GM10786组中pro-IL-1β和TNF-α的表达水平均下调,差异有统计学意义(P<0.001)。双荧光素酶报告基因证实GM10786能够与miR-142特异性结合,Nrf2是miR-142的靶基因。与转染miR-142组相比,共转染GM10786和miR-142组的THP-1细胞中Nrf2和HO-1表达水平显著增加(P<0.05),高糖刺激下IL-1β和TNF-α的表达水平均显著下降(P<0.05)。结论 GM10786是DN进程中重要的负调控因子,GM10786通过海绵吸附作用靶向结合miR-142和调节Nrf2表达来抑制DN中单核巨噬细胞炎性因子的分泌,该研究将有助于DN的靶向治疗。

• 单位
  重庆建设医院; 中国人民解放军陆军军医大学