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摘要
目的 探讨乙酰半胱氨酸(NAC)对脂多糖(LPS)诱导肺泡上皮细胞A549氧化应激、迁移、上皮间充质转化(EMT)及磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/丝苏氨酸蛋白激酶(AKT)信号通路的调控作用。方法 体外培养肺泡上皮细胞A549,分为NC组(不进行干预)、LPS组(10μg·mL-1 LPS)、NAC组(10μg·mL-1 LPS+1 mmol·L-1 NAC)、A组(10μg·mL-1 LPS+100 ng·mL-1 PI3K/AKT通路激活剂胰岛素样生长因子(IGF)-Ⅰ)、NAC+A组(10μg·mL-1 LPS+1 mmol·L-1 NAC+100 ng·mL-1 IGF-Ⅰ)和NAC+Y组(10μg·mL-1 LPS+1 mmol·L-1 NAC+5μmol·L-1 PI3K/AKT通路抑制剂LY294002),LPS和NAC分别作用24 h。用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)测定细胞活力，丙二醇(MDA)试剂盒检测MDA表达，超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒检测SOD表达，划痕法检测细胞迁移率，蛋白免疫印迹(WB)法测定PI3K、AKT、磷酸化(p)-PI3K、p-AKT、E-钙粘蛋白(E-cadherin)、N-钙粘蛋白(N-cadherin)以及波形蛋白(vimentin)的表达。结果 根据细胞活力情况选择1 mmol·L-1浓度NAC进行后续实验。与NC组相比，LPS组SOD表达、E-cadherin、p-PI3K和p-AKT蛋白水平降低，MDA表达、细胞迁移率、N-cadherin和vimentin蛋白表达升高，差异有统计学意义(P<0.05);与LPS组相比，NAC组和A组扭转了上述指标的变化，差异有统计学意义(P<0.05);与NAC组相比，NAC+A组中的IGF-I增强了NAC对A549细胞的作用，NAC+Y组中的LY294002削弱了NAC对A549细胞的作用(P<0.05)。结论 NAC可抑制LPS诱导的肺泡上皮A549细胞的氧化应激反应和迁移能力，并阻碍其EMT进程，其作用机制可能与PI3K/AKT通路的活化有关。
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单位河南省中医院; 河南中医药大学
