circBIRC6靶向miR-367-3p对卵巢癌细胞顺铂耐药性的影响

作者：张靖; 白惠娟^*

来源：中华肿瘤杂志, 2021, 43(10).

• 卵巢肿瘤
• circBIRC6
• miR-367-3p
• 顺铂
• 耐药性
• 增殖
• 凋亡

目的探讨circBIRC6对卵巢癌细胞顺铂耐药性的影响及其分子机制。方法体外培养卵巢癌细胞株SKOV3、卵巢癌顺铂耐药细胞株SKOV3/DDP, 采用脂质体介导法将si-NC、si-circBIRC6、si-circBIRC6+anti-miR-NC、si-circBIRC6+anti-miR-367-3p转染至SKOV3和SKOV3/DDP细胞, 分别记作DDP+si-NC组、DDP+si-circBIRC6组、DDP+si-circBIRC6+anti-miR-NC组和DDP+si-circBIRC6+anti-miR-367-3p组, 各组细胞中分别加入2 μg/ml的顺铂处理24 h。采用四甲基偶氮唑蓝法检测细胞增殖抑制率, 计算顺铂半数抑制浓度(IC50)值, 实时荧光定量聚合酶链反应检测circBIRC6、miR-367-3p的基因表达水平, 流式细胞术检测细胞凋亡率, 双荧光素酶报告实验验证circBIRC6、miR-367-3p的靶向关系, Western blot法检测细胞周期蛋白1(Cyclin D1)、Bcl-2、p21、Bax蛋白的表达水平。结果 SKOV3细胞中circBIRC6的表达水平为1.00±0.05, 低于SKOV3/DDP细胞(3.04±0.24, P<0.001);SKOV3细胞中miR-367-3p的表达水平为1.00±0.08, 高于SKOV3/DDP细胞(0.54±0.05, P<0.001)。SKOV3细胞、SKOV3/DDP细胞增殖抑制率分别为(22.47±2.04)%和(8.84±0.71)%, IC50值分别为6.65±0.94和28.18±4.91, 差异均有统计学意义(均P<0.05)。DDP+si-NC组SKOV3细胞增殖抑制率和细胞凋亡率[(22.19±2.19)%和(10.98±1.12)%]低于DDP+si-circBIRC6组[(74.18±5.36)%和(32.91±3.19)%, 均P<0.05];DDP+si-NC组SKOV3/DDP细胞增殖抑制率和细胞凋亡率[(8.71±0.87)%和(7.39±0.63)%]低于DDP+si-circBIRC6组[(40.85±4.07)%和(25.31±2.53)%, 均P<0.05]。DDP+si-circBIRC6组SKOV3、SKOV3/DDP细胞中Cyclin D1和Bcl-2蛋白表达水平低于DDP+si-NC组, p21和Bax蛋白表达水平高于DDP+si-NC组(均P<0.05)。双荧光素酶报告实验显示, miR-367-3p为circBIRC6的靶基因, 抑制miR-367-3p的表达可降低抑制circBIRC6的表达对卵巢癌细胞增殖、凋亡及顺铂耐药性的作用。结论抑制circBIRC6的表达可能通过上调miR-367-3p的表达而抑制卵巢癌顺铂耐药细胞增殖及诱导细胞凋亡, 从而降低细胞对顺铂的耐药性。

• 单位
  河南省肿瘤医院; 郑州大学