双链探针实时荧光PCR核酸检测新技术研究

作者：刘丽艳; 刘琪琦; 张影; 王升启^*

来源：中国生物工程杂志, 2020, 40(11): 28-34.

DOI：10.13523/j.cb.2008124

• 双链探针
• TaqMan探针
• 实时荧光PCR
• 乙肝病毒
• *2" name="keyword">CYP2C19*2

目的:采用一种"双链探针"实时荧光PCR技术,提高HBV核酸检测灵敏度,并在同一反应管中实现代谢酶CYP2C19*2基因型检测。方法:采用双链探针与TaqMan探针同时检测不同浓度HBV血清样本,使用上海宏石SLAN 96实时荧光PCR仪进行核酸Ct值检测和结果统计分析;采用双链探针检测代谢酶CYP2C19*2不同基因型样本,使用上海宏石SLAN 96实时荧光PCR仪进行核酸Ct值检测和基因型确定。结果:不同浓度HBV血清样本检测,双链探针荧光本底低,检测灵敏度更高,与TaqMan探针检测结果相比,两者核酸检测Ct值存在显著性差异(P <0.05);双链探针检测36份样本的代谢酶CYP2C19*2基因型,检测结果与Sanger测序结果完全一致。结论:双链探针实时荧光PCR检测技术可完成目的基因的高灵敏核酸检测,也可实现基因型分析。