摘要
为研究MADS-box转录因子家族成员在澳洲坚果开花及花器官发育过程的作用机制,利用PCR技术从澳洲坚果品种"桂热1号"叶片中克隆MiMADS-box基因并采用生物信息学对其结构及功能进行分析。结果表明,克隆获得的MiMADS-box基因cDNA序列全长1 179 bp,开放阅读框(ORF)729 bp,编码242个氨基酸。MiMADS-box编码一个无信号肽、无跨膜结构且定位于细胞核的不稳定亲水蛋白,存在MADS superfamily和K-box superfamily结构域,属于MIKCc型家族。系统进化分析将MiMADS-box与AGL7/AP1、AGL10/CAL1、AGL8/FUL、AGL79亲缘关系较近,聚类为FUL-AP1(SQUA)亚族。通过转录组数据分析MiMADS-box基因在"桂热1号"和"695"品种澳洲坚果枝条、花和叶片中的表达模式,表明MiMADS-box在"桂热1号"品种花中的表达量最低,"695"品种花中的表达量最高。利用同源重组的方法构建了绿色荧光蛋白融合表达载体pGREEN-MiMADSbox-ORF-GFP。推测MiMADS-box与澳洲坚果开花及花器官发育过程密切相关。本研究为阐明MiMADS-box基因在澳洲坚果开花调控机制提供理论基础和技术指导。
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