免疫共沉淀联合质谱分析筛选结直肠癌组织中GPAA1相互作用蛋白的初步研究

作者：陈光; 李世拥; 安萍; 蔡慧云

来源：中华普外科手术学杂志(电子版), 2014, 8(01): 59-62.

• 结直肠肿瘤
• 糖基磷脂酰肌醇类
• 免疫沉淀法

目的通过筛选结直肠癌组织中GPAA1相互作用蛋白以探讨GPAA1及其相互作用蛋白在结直肠癌增殖、侵袭、转移过程中的作用。方法利用免疫共沉淀技术筛选新鲜结直肠癌原发灶组织标本中GPAA1相互作用蛋白;利用MALDI-TOF/TOF-MS质谱分析技术分析鉴定GPAA1相互作用蛋白,质谱数据用Mascot软件在NCBInr数据库内进行检索,通过生物信息学分析GPAA1及其相互作用蛋白在结直肠癌增殖、侵袭、转移过程中的作用。结果通过免疫印迹检测发现结、直肠癌原发灶组织中均有GPAA1蛋白表达,大小在70 kD和62 kD之间。质谱分析筛选出5个与GPAA1相互作用蛋白,包括:PHD finger protein 10(PHF10)、促凋亡蛋白Bcl-2修饰因子、Bcl-2-related protein A1(Bcl-2A1)、Microtubule-associated protein 6(MAP6)、β1,4-半乳糖基转移酶。结论利用免疫共沉淀联合质谱分析技术成功筛选出GPAA1相互作用蛋白,GPAA1可能通过Bcl-2家族蛋白相互作用,从而阻断程序性凋亡过程促进结直肠癌细胞增殖,生长。

• 单位
  北京军区总医院; 第三军医大学