摘要
目的分析核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NLRP3)及相关炎性因子在新生大鼠坏死性小肠结肠炎(NEC)的表达水平,为临床上防治新生儿NEC提供科学依据。方法选择3日龄新生SD大鼠24只,随机分为对照组(n=12)及实验组(n=12),采用配方奶人工喂养+缺氧+冷刺激的方法诱导NEC产生。在生后第7天断头处死大鼠,取回盲部肠组织进行相关指标检测。HE染色观察回盲部肠组织病理学变化同时行双盲法进行病理学评分。TUNEL染色观察回盲部组织的细胞凋亡情况。电镜观察细胞内超微结构;ELISA法检测IL-18、IL-1β、IL-6水平;Western-blot检测Caspase-1、Bcl-2、Bim表达水平;RT-PCR检测NLRP3 mRNA水平。结果 1)HE染色显示实验组大鼠肠壁绒毛损伤程度较重,大部分绒毛中部、根部断裂,部分隐窝无法识别、可见透壁坏死。对照组肠壁绒毛损伤情况较实验组轻。2)TUNEL染色显示实验组回盲部组织细胞凋亡数目增加,对照组回盲部组织细胞凋亡数目减少(t=30.54,P<0.05)。3)电镜下显示实验组线粒体肿胀,脊结构排列紊乱,并可出现部分脆性裂解等现象;对照组的线粒体损伤情况较实验组明显减轻。4)实验组大鼠回盲部肠组织中IL-18、IL-1β、IL-6水平较对照组显著升高(t=23.38、29.78、26.90,P<0.05)。5)实验组Caspase-1、Bim水平较对照组升高(t=15.12、5.82,P<0.05),Bcl-2较对照组明显降低(t=6.03,P<0.05)。6)实验组的NLRP3 mRNA表达水平明显高于对照组(t=9.21,P<0.05)。结论 NLRP3在新生大鼠NEC的发病过程中发挥重要作用,阻断NLRP3的活化有望成为预防新生儿NEC的有效途径。
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单位青岛大学附属医院