人β防御素2在大鼠子宫内膜异位模型异位病灶组织中的转染表达

作者：范莉; 姜红叶; 李锦波; 陈淑琴

来源：中华生物医学工程杂志, 2013, 19(3): 204-209.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1674-1927.2013.03.007

• 防御素2
• 人
• 重组质粒

目的 构建人β防御素2(hBD-2)的真核表达载体PLXSN的重组质粒pLXSN-hBD2,将其转染至大鼠子宫内膜异位症(EMS)模型的局部异位病灶组织,并检测hBD-2基因和蛋白表达.方法 利用双酶切定位定向克隆技术,将hBD-2基因片段连接于pLXSN质粒的EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ两个酶切位点之间,构建重组质粒pLXSN-hBD2.自体内膜移植法建立大鼠EMS模型,将pLXSN-hBD2局部多点注射至其局部异位病灶组织,Western印迹检测局部病灶组织中的hBD-2蛋白表达.结果 经过重组质粒的鉴定电泳以及测序鉴定,设计合成的基因片段序列与GenBank中hBD-2cDNA序列完全相同,其中碱基54-248为目的基因hBD-2序列.Western印迹证实大鼠EMS模型异位病灶局部有hBD-2蛋白的表达.结论 通过局部多点注射的方法,可将携带hBD-2基因的重组质粒pLXSN-hBD2成功转染至大鼠EMS异位病灶组织中,并获得hBD-2蛋白的表达.

• 单位
  中山大学附属第一医院