miR-214对异丙酚麻醉大鼠术后神经元损伤的保护作用

作者：杨继梅; 卢文江^*; 周娇洁

来源：中国比较医学杂志, 2022, 32(09): 39-81.

• miR-214
• 异丙酚
• 开腹探查
• 大鼠
• 神经元
• mTORC1-TFEB通路

目的 探讨miR-214对异丙酚麻醉诱导的神经元损伤的保护作用及生物学机制。方法 7日龄SD雄性大鼠随机分为4组(每组15只):生理盐水组(NS)、异丙酚麻醉开腹探查组(模型)、miR-NC组和miR-214组。除NS组外，其余组别建立异丙酚麻醉开腹探查模型。miR-NC组和miR-214组分别在麻醉前将miR-NC-agomir或miR-214-agomir注射到海马内。采用免疫荧光法检测海马mTORC1的表达，TUNEL染色检测海马组织细胞凋亡，RT-qPCR分析海马组织中miR-214表达。分别将miR-214抑制剂和mTORC1抑制剂转染入HT22海马神经元细胞，然后暴露于异丙酚。采用流式细胞术分析细胞的存活情况和Western blot分析TEFB、C-caspase3蛋白表达。结果 与NS组相比，模型组大鼠海马中miR-214明显下调(P<0.05),并且海马神经细胞凋亡显著增加(P<0.05)。与模型组相比，miR-214组海马神经元凋亡减弱(P<0.05)。生物信息学预测证明mTORC1和miR-214之间存在特异性结合位点。免疫荧光检测显示，与NS组比较，模型组诱导海马神经组织中mTORC1表达增加(P<0.05),miR-214治疗显著降低了mTORC1表达(P<0.05)。此外，与NC对照组相比，si-mTORC1转染导致暴露于异丙酚的HT22海马神经元细胞的凋亡率显著降低，并且TFEB表达显著增加(P<0.01),以及C-caspase3降低(P<0.05)。而miR-214抑制剂转染显著逆转了si-mTORC1的保护作用以及诱导的TFEB、C-caspase3蛋白表达的变化(P<0.05)。结论 miR-214可能通过mTORC1-TFEB通路减轻异丙酚神经毒性，提高神经元的存活率。

• 单位
  乐山市人民医院