肺癌A549细胞中PCDH8表达及对细胞增殖、迁移、侵袭的影响

作者：孙良璋; 张丹杰; 张晋^*; ***

来源：临床肿瘤学杂志, 2019, 24(12): 1057-1062.

• 肺癌
• PCDH8
• AKT/GSK3β/β-catenin信号通路
• 增殖
• 侵袭
• 迁移

目的探讨原钙黏蛋白8(PCDH8)表达对肺癌A549细胞增殖、侵袭、迁移和AKT/GSK3β/β-catenin信号通路的影响。方法体外培养A549细胞,采用脂质体介导质粒pcDNA3.1-PCDH8(PCDH8转染组)与pcDNA3.1空质粒(阴性对照组)转染A549细胞,另设不做任何处理的空白对照组,采用实时荧光定量PCR(QPCR)和Western blotting验证转染效率。采用MTT法、克隆形成实验、Transwell法和划痕实验检测细胞增殖、集落形成、侵袭和迁移能力。Western blotting检测各组中AKT、p-Akt(Ser473)、p-Akt (Thr308)、β-catenin、GSK3β、p-GSK-3β(Ser9)蛋白的表达。结果 A549细胞中PCDH8表达水平为0.34±0.10,显著低于BEAS-2B细胞的0.98±0.08;PCDH8转染组PCDH8基因和蛋白相对表达量为2.26±0.31和1.06±0.17,明显高于空白对照组和阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。24、48、72、96 h PCDH8转染组细胞增殖率分别为(62.07±4.25)%、(106.90±5.14)%、(159.87±7.46)%、(213.79±8.28)%,明显低于空白对照组和阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。PCDH8转染组A549细胞集落形成数目为(255±38)个、24 h愈合率为(31.89±7.62)%、24 h侵袭细胞数为(217±39)个,均低于空白对照组的和阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。PCDH8转染组p-Akt(Ser473)、p-Akt (Thr308)、β-catenin、p-GSK-3β(Ser9)蛋白表达量明显低于空白对照组和阴性对照组。PCDH8与AKT具有相同的细胞定位。结论 PCDH8在肺癌中低表达,上调PCDH8表达可通过抑制AKT/GSK3β/β-catenin信号通路的激活进而降低肺癌细胞增殖、成瘤、迁移、侵袭能力。

• 单位
  西安交通大学第二附属医院