摘要
目的观察甲状腺乳头状癌(PTC)细胞中微小RNA(miR)-204对E盒结合锌指蛋白1(ZEB1)表达的影响, 及对上皮-间充质转化(EMT)及细胞侵袭能力的影响。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测甲状腺乳头状癌及其癌旁组织中miR-204的表达;将miR-204 mimics转染到甲状腺乳头状癌TPC-1细胞中, 采用荧光定量PCR的方法检测ZEB1、E-钙粘蛋白(E-cadherin)、N-钙粘蛋白(N-cadherin)及波形蛋白(vimentin)的表达水平, 应用双荧光素酶报告基因分析实验观察miR-204对ZEB1基因表达的调控作用;同时, 将miR-204 mimics与过表达ZEB1质粒共转染至人甲状腺乳头状癌细胞-1(TPC-1)细胞中, 采用Transwell细胞侵袭实验观察miR-204和ZEB1表达变化对甲状腺乳头状癌细胞侵袭能力的影响。组间比较采用t检验。结果 miR-204在甲状腺癌乳头状组织中的表达水平低于癌旁正常组织中的表达水平, 差异有统计学意义(1.14±0.08比3.52±0.07, t=13.250, P<0.05);miR-204 mimics转染组侵袭细胞数低于对照组侵袭细胞数[(149.4±20.2)个比(268.6±30.2)个, t=3.402, P<0.05], 差异有统计学意义;miR-204 mimics转染组细胞E-cadherin表达水平高于对照组细胞(0.98±0.17比0.35±0.12, t=2.903, P<0.05), 差异有统计学意义, N-cadherin和vimentin表达量低于对照组细胞(0.29±0.11比0.89±0.10, t=2.974, P<0.05;0.30±0.13比0.93±0.15, t=2.859, P<0.05), 差异有统计学意义;双荧光素酶报告基因分析结果显示, miR-204 mimics转染组ZEB1的相对荧光素酶活性低于对照组(0.23±0.06比1.12±0.04, t=12.460, P<0.05), 差异有统计学意义;甲状腺癌乳头状癌TPC-1细胞中转染miR-204 mimics组ZEB1基因的表达水平低于对照组(0.41±0.06比1.10±0.07, t=6.783, P<0.05), 差异有统计学意义;miR-204 mimics与ZEB1过表达质粒共转染后, 甲状腺癌细胞的侵袭细胞数与对照组比较差异无统计学意义[(224.4±23.5)个比(230.0±28.5)个, t=1.140, P>0.05], 差异有统计学意义。结论 miR-204能够通过靶向抑制ZEB1的表达, 从而抑制细胞发生上皮间质转化进而抑制甲状腺乳头状癌细胞的侵袭能力。
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单位河北医科大学第二医院