右美托咪定通过调控Nrf2减轻HT22细胞缺氧/复氧引起的铁死亡

作者：门运政; 胡淼; **; 段方方; 童旭辉; 黄杰; 金文静; 董淑英^*

来源：中国药理学通报, 2022, 38(10): 1480-1486.

• 右美托咪定
• 缺氧复氧损伤
• 铁死亡
• 脑缺血/再灌注损伤
• 核因子E2相关因子2
• 谷胱甘肽过氧化物酶4

目的 基于铁死亡探讨右美托咪定(dexmedetomidine, DEX)对HT22细胞缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation, H/R)损伤的保护作用及机制。方法 采用HT22细胞制备H/R损伤模型。为了探究DEX对细胞H/R损伤的保护作用的最适浓度，HT22细胞分为5组：对照组(Control)、缺氧复氧组(H/R)、低浓度DEX组(H/R+DEX2.5,2.5μmol·L-1)、中浓度DEX组(H/R+DEX5,5μmol·L-1)、高浓度DEX组(H/R+DEX10,10μmol·L-1),MTT法检测细胞的存活率。为了探讨DEX对HT22细胞H/R保护作用机制，将HT22细胞分为4组：Control组、H/R组、H/R+DEX5组、H/R+DEX5+ML385(Nrf2抑制剂)组。MTT法检测细胞的存活率；使用FerroOrange荧光探针检测细胞内Fe2+水平的变化；C11 BODIPY 581/591检测细胞中Lipid ROS的变化;使用丙二醛和还原型谷胱甘肽试剂盒检测细胞中MDA及GSH含量。蛋白免疫印记法检测细胞中核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)、谷胱甘肽过氧化物酶4 (glutathione peroxidase 4,GPX4)、转铁蛋白受体1(transferrin receptor 1,TFR1)和胱氨酸/谷氨酸逆向转运蛋白溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 member 11,SLC7A11)的表达。结果 与Control组相比，H/R损伤后细胞的存活率、GSH含量、Nrf2、GPX4和SLC7A11蛋白表达明显降低(均P<0.05),Lipid ROS、MDA、Fe2+含量和TFR1蛋白表达明显升高(均P<0.01);与H/R组相比，低、中、高浓度DEX均可使H/R损伤后细胞的存活率、GSH含量、Nrf2、GPX4和SLC7A11蛋白表达明显升高(均P <0.05),Lipid ROS、MDA、Fe2+含量和TFR1蛋白表达明显降低(均P <0.05);在DEX的基础上使用ML385后，与H/R+DEX5组相比，细胞存活率、GSH的含量、Nrf2、GPX4和SLC7A11蛋白表达明显降低(均P<0.05),Lipid ROS、MDA、Fe2+含量和TFR1蛋白表达明显升高(均P<0.05)。结论 DEX可通过抑制铁死亡减轻HT22细胞H/R损伤，这种保护作用可能与其促进Nrf2的表达有关。

• 单位
  蚌埠医学院第一附属医院; 蚌埠医学院