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摘要
目的研究佛手柑内酯是否能抑制肺癌细胞分泌可溶性白细胞介素2受体(s IL-2R)及探讨其可能机制。方法将浓度梯度(1μmol/L、10μmol/L和100μmol/L)的佛手柑内酯处理肺癌细胞(Calu-3和NCI-H292)后,利用酶联免疫吸附反应检测肺癌细胞上清s IL-2R的含量,利用实时定量聚合酶链反应检测肺癌细胞s IL-2R编码基因IL2RA的表达。利用生物信息学分析IL2RA是否受转录因子STAT3的调控,并预测IL2RA启动子区域内STAT3的结合位点。利用染色体免疫共沉淀和双荧光素酶报告基因技术,观察佛手柑内酯处理后,STAT3对IL2RA启动子结合及转录激活能力的变化。每次实验设3个复孔,每个实验重复3次以上,两组间数据比较采用t检验,多组间数据比较采用单因素方差分析,检验水平α=0.05。结果在排除细胞活性的影响后,佛手柑内酯能呈浓度梯度抑制肺癌细胞分泌s IL-2R,并抑制其编码基因IL2RA的表达。公共数据库分析显示,IL2RA受转录因子STAT3的调控,其启动子区域内有两个STAT3的结合位点。佛手柑内酯处理肺癌细胞后,能呈浓度梯度抑制STAT3对IL2RA启动子区域的结合,并能降低STAT3对IL2RA的转录激活。结论佛手柑内酯能在体外模型中,通过抑制STAT3对IL2RA启动子区域的结合及转录激活,阻抑肺癌细胞分泌s IL-2R。
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