沉默缺氧诱导因子-1α对肝癌细胞化疗敏感性影响及相关机理的研究

作者：刘利平; 陈孝平; 杨盛力; 张万广; 徐涛; 金炜东; 梁慧芳

来源：中国普外基础与临床杂志, 2008, 15(04): 234-239.

• 肝脏肿瘤
• 缺氧诱导因子-1α
• RNA干扰
• 化疗敏感性

目的观察应用短发夹RNA(shRNA)沉默缺氧诱导因子(HIF)-1α对肝癌细胞化疗敏感性的影响并探讨其相关机理。方法脂质体包裹HIF-1αshRNA表达载体(pshRNA-HIF-1α)转染到肝癌细胞HepG2细胞中,G418筛选,建立稳定的HIF-1α沉默的细胞系,并以转染空白质粒(pHK)作对照。逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测沉默HIF-1α后HIF-1αmRNA和多药耐药基因1(mdr1)mRNA变化;免疫印迹(Western blot)检测细胞HIF-1α及P-糖蛋白(P-gp)的变化。CoCl2模拟缺氧环境下,MTT和流式细胞术检测不同剂量的化疗药物(阿霉素)在HIF-1α沉默后对细胞生长抑制率和凋亡率的影响。结果pshRNA-HIF-1α转染细胞后HIF-1α干扰率在mRNA水平和蛋白水平分别为82.18%和75.51%。沉默HIF-1α后细胞mdr1 mRNA和P-gp表达显著降低(P<0.05),生长抑制率和凋亡率明显增高(P<0.05)。结论shRNA沉默HepG2细胞HIF-1α可以通过下调mdr1 mRNA和P-gp表达逆转肝癌化疗耐药,增强肝癌细胞对化疗的敏感性;可通过沉默HIF-1α作为肝癌基因治疗的一种新途径。

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属同济医院