山奈素对乳腺癌细胞增殖、凋亡的影响及其机制

作者：梁滨; 肖永生; 李荣霖

来源：山东医药, 2019, 59(35): 41-44.

• 乳腺癌
• 山奈素
• 细胞增殖
• 细胞凋亡
• 有丝分裂原活化蛋白激酶信号通路

目的探讨山奈素对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响及其可能的作用机制。方法将不同浓度(25、50、75和100μg/mL)的山奈素作用乳腺癌MCF7细胞12、24、48、72 h,MTT法检测细胞增殖抑制率,筛选山奈素的最佳作用浓度为75μg/mL、作用时间为48 h。将乳腺癌MCF7细胞分为山奈素组、索拉菲尼(sorafenib)组、ML-099+山奈素组、空白对照组,分别加入含75μg/mL山奈素的培养基、含10μmol/L有丝分裂原活化蛋白激酶(Ras/Raf/MEK/ERK)信号通路抑制剂sorafenib的培养基、含5μmol/L Ras/Raf/MEK/ERK信号通路激活剂ML-099与75μg/mL山奈素的培养基、等量PRMI1640培养基。培养48 h,采用MTT法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡率,实时荧光定量PCR法检测丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1(Raf-1)、细胞外信号调节激酶(ERK)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)mRNA表达,Western blotting法检测p-Raf-1、p-ERK、Cyclin D1、Caspase-3蛋白表达。结果山奈素组和sorafenib组细胞增殖抑制率、细胞凋亡率、Caspase-3 mRNA相对表达量均高于ML-099+山奈素组和空白对照组,Raf-1、ERK、Cyclin D1 mRNA相对表达量均低于ML-099+山奈素组和空白对照组(P均<0.05)。山奈素组和sorafenib组细胞p-Raf-1、p-ERK、Cyclin D1蛋白相对表达量均低于ML-099+山奈素组和空白对照组,Caspase-3蛋白相对表达量均高于ML-099+山奈素组和空白对照组(P均<0.05)。ML-099+山奈素组细胞p-Raf-1、p-ERK、Cyclin D1蛋白相对表达量均低于空白对照组,Caspase-3蛋白相对表达量高于空白对照组(P均<0.05)。山奈素组、sorafenib组上述指标比较P均>0.05。结论山奈素可抑制乳腺癌细胞增殖并促进其凋亡,其机制可能与抑制Ras/Raf/MEK/ERK信号通路有关。