痰液miR-155检测作为诊断结核分枝杆菌感染标志物的研究

作者：陈思达; 卓宋明; 李娜; 黄震; 季乐财; 唐晓磊^*

来源：中国热带医学, 2020, 20(04): 359-363.

DOI：10.13604/j.cnki.46-1064/r.2020.04.14

• 结核分枝杆菌
• 微小核糖核酸
• 痰液
• 诊断

目的分析结核分枝杆菌H37Rv感染诱导宿主巨噬细胞表达miRNA的变化,进而验证差异miRNA对结核分枝杆菌感染的临床诊断意义。方法使用H37Rv菌株感染人巨噬细胞系THP-1细胞后,收集12 h、24 h和48 h细胞并提取总RNA,进行miRNA微阵列芯片分析;再将临床分离的120株不同个体来源的结核分枝杆菌菌株与THP-1细胞共培养,使用实时定量PCR (real time-PCR, rt-PCR)验证差异miRNA的表达水平;随后收集结核患者的痰液标本处理后,提取总RNA,进行实时荧光定量PCR检测痰液中的差异表达的miRNA水平。结果 H37Rv体外刺激THP-1细胞,使用miRNA微阵列芯片分析,结果显示:miR-155、miR-29b-1*、miR-150、miR-146a、miR-212和miR-483-5p共计6个miRNAs水平在3个时间点升高均较为明显;将来自不同区域的120株结核菌株分别与THP-1细胞的共培养24 h,检测发现miR-155表达水平最高;以miRNA-155为检测靶标,对68例结核患者的痰液进行检测,灵敏度和特异度分别为94.1%和93.8%。其灵敏度高于痰涂片的22.1%和结核抗体的83.8%,差异具有统计学意义(P<0.05)。但与ELISpot法的97.1%,差异无统计学意义(P>0.05)。在对痰涂片阳性结果与miRNA检测结果相关性分析中,发现miR-155其表达水平与痰涂片阳性等级呈正相关(R2=0.743, P<0.05)。结论此研究提示miR-155能够作为活动性结核诊断的有效靶标,且对间接评估患者肺部荷菌量有重要意义。

• 单位
  皖南医学院第二附属医院; 深圳市龙岗中心医院; 深圳市慢性病防治中心