酵母单杂交体系筛选胃cDNA文库中IRX1的核心启动子结合蛋白

作者:张荣娟; 于颖彦; 霍克克; 张迪; 李璞; 计骏; 张佳年; 陈雪华; 刘炳亚; 朱正纲
来源:中华实验外科杂志, 2011, 28(3): 346-348.
DOI:10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2011.03.007

摘要

目的 以IRX1基因启动子为诱饵,在胃cDNA文库内钓取与之相互作用的蛋白质.方法 构建IRX1启动子诱饵报告基因质粒并转化酵母单杂交(Y1H)Gold酵母获得诱饵基因酵母菌;抽提人胃组织总RNA,逆转得到cDNA文库,文库片段为0.3~2.5 Kb,作为猎物与线性化pGADT7-Rec文库质粒共转染诱饵酵母菌.结果 对胃cDNA文库的筛选效率达到3×106,从人胃组织cDNA文库共钓取到8个

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