RNA干扰LncRNA GIHCG表达通过负调控miR-204-5p对肺癌细胞吉非替尼耐药性的影响

作者：王守忠; 孔海燕^*

来源：中国老年学杂志, 2022, 42(08): 1978-1983.

• LncRNA GIHCG
• miR-204-5p
• 肺癌
• 吉非替尼
• 耐药性

目的 探讨RNA干扰长链非编码RNA GIHCG(LncRNA GIHCG)表达通过调控微小RNA-204-5p(miR-204-5p)参与肺癌细胞对吉非替尼耐药性的分子机制。方法 构建肺癌吉非替尼耐药细胞株(HCC827 GR),用不同浓度的吉非替尼处理HCC827 GR细胞与肺癌HCC827细胞，采用细胞计数试剂盒(CCK)-8法检测细胞增殖抑制率及计算吉非替尼的半数抑制浓度(IC50)以此评估其耐药性。实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测HCC827 GR细胞中GIHCG与miR-204-5p的表达；双荧光素酶报告基因验证GIHCG与miR-204-5p的靶向关系。分别将si-GIHCG、si-NC、miR-204-5p、miR-NC转染至HCC827 GR细胞，随后使用吉非替尼处理。CCK-8法检测细胞增殖抑制率；流式细胞术检测细胞凋亡率；Western印迹检测细胞周期蛋白(Cyclin)D1、B淋巴细胞瘤(Bcl)-2、p21、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达量。结果 HCC827 GR细胞中GIHCG的表达水平显著高于HCC827细胞(P<0.05),而miR-204-5p的表达水平显著低于HCC827细胞(P<0.05),与pcDNA组HCC827 GR细胞中miR-204-5p表达水平相比，pcDNA-GIHCG组显著降低(P<0.05);与si-NC组HCC827 GR细胞中miR-204-5p表达水平相比，si-GIHCG组显著升高(P<0.05)。相较于吉非替尼+si-NC组，吉非替尼+si-GIHCG组HCC827 GR细胞中GIHCG的表达水平显著降低(P<0.05),细胞增殖抑制率显著升高(P<0.05),细胞凋亡率显著升高(P<0.05),CyclinD1、Bcl-2、蛋白相对表达量显著降低(P<0.05),p21、Bax蛋白相对表达量显著升高(P<0.05),相较于吉非替尼+miR-NC组，吉非替尼+miR-204-5p组HCC827 GR细胞中miR-204-5p的表达水平显著升高(P<0.05),细胞增殖抑制率与细胞凋亡率均显著升高(P<0.05),CyclinD1、Bcl-2蛋白相对表达量显著降低(P<0.05),p21、Bax蛋白相对表达量显著升高(P<0.05),与吉非替尼+si-GIHCG+anti-miR-NC组相比，吉非替尼+si-GIHCG+anti-miR-204-5p组HCC827 GR细胞中miR-204-5p的表达水平显著降低(P<0.05),细胞增殖抑制率与细胞凋亡率均显著降低(P<0.05),CyclinD1、Bcl-2蛋白相对表达量显著升高(P<0.05),p21、Bax蛋白相对表达量显著降低(P<0.05)。结论 LncRNA GIHCG通过调控miR-204-5p增强肺癌细胞对吉非替尼的耐药性。

• 单位
  滕州市中心人民医院