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摘要
为明确几丁质酶1(chitinase 1,Chi1)编码基因在二点螟Chilo infuscatellus中的潜在功能，对Chi1基因进行全长序列克隆和生物信息学分析，使用实时荧光定量PCR技术检测该基因的时空表达模式，利用RNA干扰技术探究其在二点螟生长发育方面的功能。结果表明，二化螟Chi1基因序列全长为1 788 bp，开放阅读框为1 653 bp，编码550个氨基酸，并命名为CiChi1;CiChi1基因在二点螟不同发育阶段及不同组织中均有表达，其中在成虫期的相对表达量最高，在6龄幼虫期的相对表达量次之，且在6龄幼虫表皮中的相对表达量最高；在RNA干扰试验中，注射ds CiChi1的二点螟3龄幼虫试验组在第14天的最终死亡率为62.0%，显著高于注射ds EGFP的阴性对照组（27.8%）和注射蒸馏水的空白对照组（33.9%）；此时试验组的平均虫重为0.024 g，显著低于阴性对照组（0.039 g）和空白对照组（0.040 g），且试验组试虫还伴随有外表皮急剧变黑、消解软化的致死表型；实时荧光定量PCR检测结果表明，试验组试虫体内CiChi1基因表达量较阴性对照组和空白对照组显著下调。表明CiChi1基因可能主要参与二点螟变态发育时期和成虫时期的形态建成，同时调控二点螟幼虫阶段表皮的再生与消解。
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