猪葡萄球菌脱落毒素ExhA的表达与纯化

作者：张鹏飞; 申翰钦; 刘相聪; 刘燕玲; 张乐宜; 王磊; 宋长绪^*

来源：黑龙江畜牧兽医, 2018, (22): 73-76.

DOI：10.13881/j.cnki.hljxmsy.2018.05.0481

• 猪
• 葡萄球菌
• 脱落毒素ExhA
• 渗出性皮炎
• 蛋白表达
• Western-blot

为了研究猪葡萄球菌脱落毒素ExhA的生物学活性,试验以猪葡萄球菌的基因组DNA为模板,PCR扩增ExhA全基因序列,连接到pCold TF表达载体上,构建重组质粒pCold TF-ExhA,将重组质粒转入E.coil BL2(DE3),IPTG低温诱导目的蛋白可溶性表达,重组表达的蛋白用Ni-IDA琼脂糖纯化树脂纯化,Western-blot及攻毒试验验证表达蛋白质的生物学功能。结果表明:成功构建了pCold TF-ExhA重组质粒,并且脱落毒素ExhA主要以可溶性形式表达,表达纯化的脱落毒素ExhA具有完整的生物学活性。说明表达的脱落毒素ExhA具有良好的抗原性。

• 单位
  动物科学学院; 华南农业大学