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摘要
流式细胞分选是纯化活细胞较为常用的实验方法,是获得高活性细胞的有效手段,其中收集液为分选后的细胞提供一定的营养环境,从而保证分选后细胞的高活性。该研究选用流式细胞分选仪分选人肾上皮细胞系HEK293T(简称293T)细胞,用3组即A组(含BSA的PBS缓冲液)、B组(含FBS的PBS缓冲液)、C组(含FBS的DMEM培养基)收集液分别接收分选后的293T细胞,以流式细胞检测法、细胞计数试剂盒(Cell Counting Kit-8,CCK-8)检测法、实时细胞分析(Real Time Cellular Analysis,RTCA)检测法分别检测分选后细胞的活性情况并进行统计分析。结果显示,A组中含0.4% BSA的PBS缓冲液、B组中含10% FBS的PBS缓冲液、C组中含10% FBS的DMEM培养基接收的细胞活性分别高于各组内的对照,凋亡率分别为(4.12±0.474)%、(4.10±0.660)%、(3.71±0.291)%,均具有显著性统计学差异(P<0.000 1)。比较三种细胞活性检测方法发现,RTCA检测法具有极简的操作流程,无须标记,可实时获得细胞的动态增殖曲线的优点,可作为分选后细胞活性最客观的检测方法。该研究为揭示收集液对细胞活性的影响提供参考依据,为快速客观检测分选后细胞活性提供实时检测方法。
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