核心蛋白聚糖基因改造及真核表达载体的构建

作者：韩旭; 王玲玲

来源：中国老年学杂志, 2013, (22): 5638-5640.

• 核心蛋白聚糖
• 聚合酶链式反应(PCR)
• 真核表达载体

目的改造核心蛋白多糖基因(DCN)并构建真核表达载体,为进一步探讨DCN蛋白的肿瘤抑制作用奠定基础。方法以含有重组DCN的质粒pBluescript为模板采用聚合酶链式反应(PCR)扩增目的基因片段。真核表达载体pcDNA3.1及PCR产物经EcoRⅠ及XhoⅠ双酶切后连接,转化入大肠杆菌JM109中,获得重组载体pcDNA3.1-DCN/His(M-DCN),进行酶切鉴定和测序鉴定。结果 PCR获得目的片段(1 119 bp),重组载体pcDNA3.1-DCN/His经双酶切及测序证实,DCN的cDNA片段正确插入真核表达载体中。结论成功构建含有M-DCN基因的真核表达载体。

• 单位
  北华大学附属医院; 吉林大学