Cdc42-shRNA表达载体的构建及在肝癌细胞株的沉默效果

作者：解英俊; 张学文; 杨永生; 赵吉生

来源：中国实验诊断学, 2010, 14(04): 505-507.

DOI：10.3969/j.issn.1007-4287.2010.04.010

• Cdc42
• RNA干扰
• 转染 Cdc42
• RNA interference
• Transfection

目的构建Cdc42-shRNA真核表达载体。方法合成Cdc42的基因干扰序列并定向插入到RNA干扰(RNAi)真核表达载体pGenesil-1质粒,通过测序进行鉴定。干扰质粒经脂质体Lipofectamine2000介导转染肝癌细胞,Westernblot方法检测沉默效率。结果测序证明干扰序列完全正确,Westernblot结果显示Cdc42-shRNA对肝癌细胞株内源性Cdc42有较好的沉默效果。结论成功构建了Cdc42-shRNA真核表达载体,为进一步研究Cdc42在基因治疗中的作用奠定基础。

• 单位
  吉林大学中日联谊医院