科研之友
微信
新浪微博
Facebook
分享链接
摘要
目的 内质网应激(ERS)是狼疮性肾炎(LN)进展期间的致病因素之一。虽然microRNAs(miRNAs)已经被证明与狼疮性肾炎的发生发展有密切关系，但内质网应激与miRNA在肾系膜细胞中的作用仍不清楚。本研究探讨miRNA-155在肾系膜细胞内质网应激中的作用及其在LN中作用机制。方法 通过在40只小鼠(10只正常和30只LN小鼠)模型中进行肾组织活检来检验内质网应激的活性；分别在CTL和LN组间，ERS阳性/阴性亚组间，通过qRT-PCR实验检测miRNA-155的表达水平，通过Western Blot实验检测肾炎组织中PI3K-Akt-mTOR信号通路相关蛋白(P85、Akt、p-Akt、m-TOR、p-mTOR、S6、p-S6)以及内质网应激诱导型分子伴侣GRP78的表达情况；在体外肾系膜细胞中诱导内质网应激后，构建miRNA-155对照组和干扰组(沉默miRNA-155,或者添加PI3K-Akt-mTOR信号通路抑制剂),分别通过qRT-PCR实验检测细胞中miRNA-155的表达水平，通过MTT实验检测系膜细胞增殖能力，通过qRT-PCR、Western Blot实验检测PI3K-Akt-mTOR信号通路相关蛋白在mRNA水平和蛋白质水平的情况。结果 (1)在大多数狼疮性肾炎模型中均表现出内质网应激反应为阳性。(2)在内质网应激活性为阳性的狼疮均表现出miRNA-155高表达。(3)在肾系膜细胞中，诱导内质网应激后发现miRNA-155表达增高，且细胞增殖能力增强；在诱导内质网应激后，沉默miRNA后，细胞增殖能力下降。(4)在ERS(+)肾系膜细胞中，发现miRNA-155表达增高的同时，Western Blot实验显示PI3K-Akt-mTOR信号通路相关蛋白水平均增高；在肾系膜细胞中，诱导内质网应激后，沉默miRNA-155后，Western Blot实验显示PI3K-Akt-mTOR信号通路相关蛋白水平均下降；在ERS(+)肾系膜细胞中，发现miRNA-155表达增高的同时，添加PI3K通路抑制剂后，细胞增殖能力下降。结论 内质网应激可使狼疮性肾炎患者中miRNA-155表达增加，进而作用于PI3K-Akt-mTOR信号通路促进狼疮性肾炎进展。
-
单位中南大学湘雅医学院
