摘要
目的拟通过动物实验阐明脓毒症早期骨髓血管内皮系统在组织、细胞层面以及转录水平发生的变化。方法通过盲肠结扎穿刺(cecal ligation and puncture, CLP)建立小鼠脓毒症模型, 利用HE染色、组织免疫荧光、流式细胞分析以及实时荧光定量PCR等技术分析骨髓血管结构、通透性、血管内皮细胞相对比例和血管内皮细胞活化基因mRNA表达情况。结果骨髓血管系统在脓毒症早期发生一系列适应性改变。组织学分析表明, 骨髓血管结构发生明显重塑, CLP组小鼠骨髓血窦平均密度为(410.43±72.63)个/mm2, 较假手术组(294.43±68.94)个/mm2明显增加(P<0.01);管腔面积占比为(43.46±3.21)%, 显著高于假手术组[(30.28±4.44)%, P<0.001];CLP组小鼠骨髓组织中伊文思蓝含量为(0.42±0.12)ng/mg组织, 显著高于假手术组[(0.24±0.09)ng/mg组织, P<0.05], 提示血管通透性升高。流式细胞分析结果表明, CLP组小鼠骨髓内皮细胞呈现增殖状态, Ki67+内皮细胞比例升高[(1.91±0.65)%比(5.06±1.10)%, P<0.01];转录水平分析表明, 与血管内皮细胞活化有关的部分基因mRNA水平上调。结论早期脓毒症改变了骨髓血管和血管内皮细胞的结构与功能, 对骨髓微环境产生了较为显著的影响。
-
单位上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心