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摘要
[目的]提高现有产异戊二烯大肠杆菌工程菌株合成异戊二烯的产量。[方法]首先对异戊二烯合成酶这一关键酶进行RBS序列优化,提高了异戊二烯的产量;然后通过构建异戊二烯焦磷酸异构酶和异戊二烯合酶的融合蛋白,研究这两个蛋白间的交互作用,将异戊二烯的产量提高了40%;最后通过RBS策略,对甲羟戊酸下游途径的非关键酶进行表达调控,继续提高了异戊二烯的产量。[结果]利用优化RBS序列和融合蛋白策略,异戊二烯的产量最终提高到60 mg/L,比原始工程菌株提高了10倍。[结论]RBS序列优化可能成为菌株代谢工程改造的有力手段。此外,为了提高工程菌株的产量,不仅要关注关键酶,还要关注非关键酶。
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单位东北林业大学; 生命科学学院
