实时定量RT-PCR技术测定初治白血病患者常见融合基因转录子水平及其标准化的探讨

作者：秦亚溱; 李金兰; 主鸿鹄; 李玲娣; 常艳; 郝乐; 阮国瑞; 刘艳荣; 黄晓军; 陈珊珊

来源：中华血液学杂志, 2007, 28(07): 433-437.

DOI：10.3760/j:issn:0253-2727.2007.07.001

• 白血病
• 融合蛋白质类
• 逆转录聚合酶链反应,实时定量

目的了解白血病常见融合基因 M-bcr-abl(表达产物为 P210~(bcr-abl))、m-bcr-abl(表达产物为 P190~(bcr-abl))、TEL-AML1、AML1-ETO、PML-RARα、CBFβ-MYH11在初治白血病患者中的表达水平。方法采用基于 TaqMan 探针的实时定量 RT-PCR(RQ-PCR)技术检测195例白血病患者骨髓细胞融合基因转录子水平,其中 M-bcr-abl~+慢性粒细胞白血病慢性期(CML-CP)50例、M-bcr-abl~+急性淋巴细胞白血病(ALL)10例、m-bcr-abl~+ ALL 19例、TEL-AML1~+ ALL 11例、AML1-ETO~+急性髓系白血病(AML)30例、PML-RARα~+急性早幼粒细胞白血病(APL)58例、CBFβ-MYH11~+ AML 患者17例,并检测13例 M-bcr-abl~+ CML-CP 患者的外周血细胞融合基因转录子水平。以 abl 作为内参基因,融合基因转录子水平以融合基因转录子拷贝数/abl 基因转录子拷贝数×100%表示。结果 CML-CP 患者骨髓及外周血 M-bcr-abl 转录子水平相似(中位值分别为30%和35%,P>0.05)、ALL 患者 M-bcr-abl 及m-bcr-abl 转录子水平相似(中位值分别为64%和54%,P>0.05),ALL 患者 M-bcr-abl 转录子水平明显高于 CML-CP 患者(P<0.001)。ALL 患者 TEL-AML1转录子中位水平为228%。表达特异性融合基因的 AML 患者中,AML1-ETO 转录子水平明显高于 CBFβ-MYH11及 PML-RARα(中位值分别为388%,145%和47%,P 值均<0.001),CBFβ-MYH11转录子明显高于 PML-RARα(P<0.001)。L 型、V 型及 S 型 PML-RARα转录子中位水平分别为45%、44%及55%,L 型明显低于 S 型(P=0.04)。结论不同类型融合基因转录子在初治白血病患者中的水平不同,并有个体差异。初治患者融合基因转录子水平的测定不仅为检测微量残留病、评价疗效提供基准值,而且是不同实验室间数据比较、实现标准化的基础。

• 单位
  北京大学人民医院