鲫鱼Vitellogenin基因的克隆与组织表达分析

作者：李青; 何斌; 赵海涛

来源：河南农业科学, 2021, 50(02): 151-161.

DOI：10.15933/j.cnki.1004-3268.2021.02.019

• 鲫鱼
• Ca-VtgAo1基因
• Ca-VtgC基因
• 系统进化分析
• 组织表达

为研究鲫鱼不同卵黄蛋白原(Vtg)亚型基因生物学功能及其分子机制,克隆鉴定了鲫鱼中Vtg同源基因的2种亚型,分别命名为Ca-VtgAo1和Ca-VtgC。Ca-VtgAo1和Ca-VtgC cDNA序列全长分别为4 241 bp和4 207 bp,开放阅读框(ORF)分别为3 873 bp和3 612 bp, 5′非编码区(UTR)分别为192 bp和150 bp, 3′UTR分别为176 bp和445 bp,分别编码1 290个和1 203个氨基酸残基,预测蛋白质分子质量分别为140.6 ku和134.8 ku。结构域分析结果显示,Ca-VtgAo1和Ca-VtgC都具有LPDN(Lipoprotein N-terminal domain)、DUF1943和DUF1944保守结构域,而都不具有β′组分卵黄蛋白(β′-component yolk protein,β′-C)和C-末端组分卵黄蛋白(Carboxy-terminal component yolk protein, CT)结构域,且Ca-VtgAo1富含磷酸化多聚丝氨酸(Phosvitin, Pv)结构域,Ca-VtgC没有该结构域。进化分析结果表明,VtgC先与尖端单鳍七鳃鳗(Ichthyomyzon unicuspis)VtgABCD聚为一支,再与VtgAa、VtgAb、VtgAe、VtgAo聚为一支,Ca-VtgAo1由于存在Pv结构域,其进化速率比Ca-VtgC快。实时荧光定量PCR分析结果表明,Ca-VtgAo1 mRNA在检测组织中均有表达,其中在肝脏组织中的相对表达量最高,且雌性肝脏中Ca-VtgAo1 mRNA相对表达量是雄性肝脏中的50倍,推测鲫鱼Vtg来源主要是肝脏外源性合成,但依然保留卵巢内源性合成Vtg的古老方式,Ca-VtgAo1基因可作为分子标记应用于鲫鱼性别鉴定。

• 单位
  贵州工程应用技术学院