TLR7激动剂经lnc-DC/STAT3而非lnc-THRIL途径刺激肾癌患者PBMCs增强抗肿瘤作用

作者：吴波; 陈林; 何平林; 叶鑫; 吴建军; 陈果; 刁建军; 张汉超; 陈亮

来源：中国免疫学杂志, 2022, 38(01): 56-60.

DOI：10.3969/j.issn.1000-484X.2022.01.010

• 肾癌
• Toll样受体7
• lnc-DC
• STAT3
• lnc-THRIL
• 外周血单个核细胞

目的:探讨Toll样受体7激动剂gardiquimod刺激肾癌患者外周血单个核细胞(PBMCs)抗肿瘤的作用机制。方法:将肾癌患者外周血单个核细胞和肾癌细胞共同培养,使用TLR7激动剂刺激肾癌患者外周血单个核细胞(PBMCs),将TLR7激动剂激活的PBMCs转染shRNA(lnc-DC/STAT3)和shRNA(lnc-THRIL)并分为4组:对照组、TLR7激动剂组、shRNA lncDC组和shRNA lnc-THRIL组。应用Real-time PCR检测lnc-DC和lnc-THRIL表达量;Western blot检测STAT3、p-STAT3、P21、P27表达量;51Cr释放实验检测PBMCs抗肿瘤细胞活性变化;流式细胞术检测肾癌细胞周期变化。结果:TLR7激动剂刺激PBMCs组中lnc-DC的mRNA水平表达量明显增高,shRNA lnc-DC组lnc-DC表达量较对照组明显降低,shRNA lnc-THRIL组lnc-THRIL表达量较对照组明显降低(P<0.05);抗肿瘤相关指标分子表达增加;与对照组相比,TLR7组中肾癌细胞的P27蛋白表达量明显增加,而P21蛋白表达量无明显变化,TLR7激动剂+shRNA lnc-DC组P27蛋白表达量与TLR7组明显降低(P<0.05),与对照组相比差异无统计学意义;TLR7激动剂+shRNA lnc-THRIL组较TLR7激动剂组的P21和P27表达量均有降低;TLR7激动剂3个实验组中STAT3蛋白表达量无明显差异,pSTAT3在TLR7激动剂+shRNA lnc-DC组中明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);PBMCs对肾癌细胞的杀伤率在TLR7激动剂+shRNA lnc-DC组较另外两实验组明显降低,且差异有统计学意义(P<0.05)。结论:TLR7激动剂经lnc-DC/STAT3而非lnc-THRIL途径刺激肾癌患者PBMCs增强抗肿瘤作用,pSTAT3表达量与抗肿瘤增殖密切相关,并可能影响P27周期调节蛋白表达导致肾癌细胞周期停滞。

• 单位
  成都大学附属医院; 四川大学华西医院; 中心实验室; 成都医学院; 成都市郫都区人民医院