塞尼卡谷病毒3ABC蛋白的表达、纯化及多克隆抗体制备

作者：连凯琪; 周玲玲; 张明亮^*; 张慢; 王英杰; 林正丹; 宋玉伟

来源：河南农业科学, 2020, 49(01): 123-127.

DOI：10.15933/j.cnki.1004-3268.2020.01.017

• 塞尼卡谷病毒
• 3ABC蛋白
• 原核表达
• 蛋白质纯化
• 多克隆抗体

为了开发塞尼卡谷病毒(Seneca Valley virus,SVV)的检测试剂盒,克隆3ABC基因进行原核表达和纯化,并将纯化的3ABC蛋白免疫大鼠,制备抗3ABC蛋白的多克隆抗体。通过Western blot鉴定制备的多克隆抗体与表达的3ABC蛋白的特异性识别能力,通过ELISA测定多克隆抗体的效价。结果显示,3ABC基因在大肠杆菌中大量表达,且主要以包涵体形式表达,重组蛋白分子质量约为55 ku,经纯化后得到单一条带。免疫大鼠制备的多克隆抗体效价大于1∶64 000,且与表达的3ABC重组蛋白发生特异性反应。综上,在大肠杆菌中成功表达了SVV 3ABC蛋白,且表达的重组蛋白具有免疫原性。

• 单位
  安阳工学院