微小RNA-125b过表达对卵巢癌SKOV3细胞抗失巢凋亡的作用

作者：王华; 吴维光; 王筝; 闫洪亮; 王迎春

来源：中国妇产科临床杂志, 2014, 15(05): 391-394.

DOI：10.13390/j.issn.1672-1861.2014.05.003

• 卵巢癌
• 微小RNA 125b
• 失巢凋亡
• BDNF/TrkB途径

目的通过在人卵巢癌SKOV3细胞中转染微小RNA-125b(miR-125b)真核表达质粒,探讨miR-125b过表达对SKOV3细胞失巢凋亡的作用及可能机制。方法针对miR-125b基因序列设计并合成两条寡聚DNA片段,并克隆入pSilencer 2.1-U6-neo质粒中,脂质体法将重组质粒转染人卵巢癌SKOV3细胞。定量PCR方法检测miR-125b,以及BDNF和TrkB基因mRNA表达;Western blot检测BDNF和TrkB蛋白表达;体外侵袭模型检测细胞侵袭能力;失巢凋亡模型及流式细胞术检测细胞失巢凋亡。结果成功构建miR-125b真核表达载体并转染人卵巢癌SKOV3细胞,SKOV3细胞miR-125b表达增加;同时BDNF和TrkB基因mRNA和蛋白表达均降低;穿透Matrigel膜的细胞数减少;细胞失巢凋亡增加。结论 miR-125b基因过表达能够诱导人卵巢癌SKOV3细胞失巢凋亡和抑制细胞侵袭能力,抑制BDNF/TrkB途径可能是其作用机制。

• 单位
  天津武警后勤学院附属医院