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摘要
旨在建立一种可同时快速检测大肠杆菌O157∶H7、沙门菌和产单核细胞李氏杆菌3种食源性致病菌的TaqMan多重荧光定量PCR(qPCR)方法。针对大肠杆菌O157∶H7 rfbE基因、沙门菌invA基因和产单核细胞李氏杆菌hlyA基因的保守序列分别设计特异性引物和TaqMan探针，建立多重qPCR反应体系，进行特异性、灵敏性和重复性试验，应用建立的方法检测生鲜食品中致病菌并与国家标准方法对比。结果显示：建立的多重qPCR方法特异性好，只扩增3种靶细菌；灵敏性最低检测值均为104 copies·μL-1;重复性良好，批内变异系数为0.09%～2.97%,批间变异系数为0.23%～7.82%;对120份生鲜肉样品进行检测对比，两种方法均检出2份大肠杆菌O157∶H7,21份产单核细胞李氏杆菌，多重qPCR方法检出14份沙门菌，比国标法多检出1份，建立的方法可检出所有受污染样品。综上表明，建立的多重qPCR检测方法能快速、准确检测食品中大肠杆菌O157∶H7、沙门菌和产单核细胞李氏杆菌3种食源性致病菌，为食品安全提供技术保障。
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单位河北农业大学; 石家庄市金元康牧药业有限公司; 河北省畜牧兽医研究所
