RNA结合蛋白38通过增加人表皮生长因子受体2的表达诱导乳腺癌BT474细胞对曲妥珠单抗的敏感性

作者：李春莲; 周旭婕; 娄培培; 夏添松; 石靓; 王莹; 丁强

来源：中华肿瘤杂志, 2016, 38(03): 172-178.

DOI：10.3760/cma.j.issn.0253-3766.2016.03.003

• 乳腺肿瘤
• RNA结合蛋白38
• 人表皮生长因子受体2
• 增殖
• 凋亡

目的探讨敲除和过表达外源性RNA结合蛋白38(RNPC1)基因后,人表皮生长因子受体2(HER-2)阳性乳腺癌细胞对曲妥珠单抗敏感性的变化。方法采用慢病毒转染法敲除和过表达RNPC1基因,采用实时荧光定量PCR法检测各组BT474细胞中RNPC1和HER-2 mRNA的表达,Western blot法检测RNPC1和HER一2蛋白以及PI3K/AKT蛋白的表达。以不同浓度的曲妥珠单抗处理各组BT474细胞,采用流式细胞术检测各组BT474细胞的凋亡率,细胞计数试剂盒8(CCK一8)法检测生长抑制率。以20μg/ml曲妥珠单抗处理各组BT474细胞,采用Western blot法检测各组BT474细胞中凋亡相关蛋白的表达。结果实时荧光定量PCR和Western blot法检测结果均显示,RNPC1过表达后,RNPC1和HER2 mRNA及蛋白的表达均增高;而敲除RNPC1基因后,RNPC1和HER2mRNA及蛋白的表达均降低。RNPC1的过表达能减少BT474细胞中p-PI3K和p-AKT蛋白的表达;RNPC1的敲除能增加p-PI3K和p-AKT蛋白的表达。5、10、15、20和25gμ/ml曲妥珠单抗处理敲除实验组BT474细胞48 h后的生长抑制率分别为(9.67±1.18)%、(21.67±1.23)%、(30.33±1.25)%、(40.33±1.69)%和(53.00±1.63)%,均明显低于相应浓度曲妥珠单抗处理的敲除对照组[分别为(14.00±0.82)%、(27.67±1.25)%、(39.67±1.79)%、(53.67±1.50)%和(63.33±1.52)%,均P<0.05]。5、10、15、20和25μg/ml曲妥珠单抗处理过表达实验组BT474细胞48 h后的生长抑制率分别为(20.33±1.25)%、(35.38±2.05)%、(50.43±2.12)%、(65.35±2.08)%和(76.00±2.16)%,均明显高于相应浓度曲妥珠单抗处理的过表达对照组[分别为(13.67±1.24)%、(27.86±2.05)%、(39.72±1.69)%、(53.33±1.70)%和(62.68±2.07)%,均P<0.05]。10、20和30μg/ml曲妥珠单抗处理敲除实验组BT474细胞48 h后的凋亡率分别为(11.64±0.68)%、(16.60±1.01)%和(25.14±3.12)%,均明显低于相应浓度曲妥珠单抗处理的敲除对照组[分别为(14.71±0.61)%、(22.65±0.96)%和(39.03±0.85)%,均P<0.05]。10、20和30μg/ml曲妥珠单抗处理过表达实验组BT474细胞48 h后的凋亡率分别为(19.46±1.06)%、(30.87±0.98)%和(50.45±1.13)%,均明显高于相应浓度曲妥珠单抗处理的过表达对照组[分别为(14.38±0.64)%、(21.65±1.24)%和(38.03±0.85),均P<0.05]。RNPC1的过表达能增加BT474细胞中促凋亡蛋白Bim和Bad的表达,降低抑凋亡蛋白Bcl-xl的表达;RNPC1的敲除能减少Bim和Bad蛋白的表达,增加Bcl-xl蛋白的表达。结论RNPC1可以通过增加BT474乳腺癌细胞中HER-2的表达,诱导乳腺癌细胞对曲妥珠单抗的敏感性。

• 单位
  南京医科大学第一附属医院