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摘要
采用RT-PCR的方法扩增人Mcm6基因,克隆入真核表达载体pEGFP-N3,成功构建了pEGFP-Mcm6真核表达质粒,酶切及DNA测序证实了构建质粒序列的正确性。脂质体介导转染Hela细胞后,荧光显微镜可检测到绿色荧光信号,通过G418筛选最终获得了稳定表达的细胞株,Western blot验证了稳定表达细胞株中Mcm6-GFP融合蛋白的表达。本实验成功建立了稳定表达Mcm6-GFP融合蛋白的细胞株,为动态观察Mcm6细胞定位的变化,进一步研究抗肿瘤药物的作用机制提供了有效的分子工具。
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单位中山大学肿瘤防治中心; 华南肿瘤学国家重点实验室; 南方医科大学
