人原代支气管上皮细胞的简易分离和培养

作者：谢冬; 翟成凯; 刘影影; 赵乐; 张彬彬; 吴卫东^*

来源：新乡医学院学报, 2018, 35(10): 854-864.

• 人支气管上皮细胞
• 原代培养
• 鉴定

目的建立一种实验环境更贴合人体、方便快捷、细胞活性和纯度较高的支气管上皮细胞原代培养方法。方法通过纤维支气管镜刷检获取新乡市第一人民医院收治的63例患者正常的支气管上皮细胞,采用无血清的支气管上皮细胞培养基(BEGM)进行纯化、分离,行原代培养并传代,锥虫蓝染色,光学显微镜下观察细胞存活状态并测定细胞存活率,通过倒置生物式显微镜和免疫组织化学染色观察鉴定细胞。结果人支气管上皮细胞的平均存活率为(96.8±0.5)%,细胞免疫荧光角蛋白染色阳性,兔抗人细胞角蛋白8单克隆抗体免疫组织化学染色显示细胞质着色为绿色,细胞核复染为蓝色,鉴定为人原代支气管上皮细胞。结论经纤维支气管镜刷检获取并采用无血清BEGM培养人原代支气管上皮细胞操作简便、快捷有效,细胞存活率较高,能够提高上皮细胞纯度,可以为研究呼吸系统疾病提供良好的模型。

• 单位
  公共卫生学院; 新乡市第一人民医院; 新乡医学院