甘蔗抗坏血酸过氧化物酶基因ScAPX1的克隆和表达分析

作者：张保青; 邵敏; 黄玉新; 黄杏; 宋修鹏; 陈虎; 王盛; 谭秦亮; 杨丽涛^*; 李杨瑞^*

来源：生物技术通报, 2019, 35(12): 31-37.

DOI：10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2019-0396

• 甘蔗
• ScAPX1
• 基因克隆
• 低温胁迫
• 表达分析

通过克隆甘蔗ScAPX1及分析其在低温胁迫中的表达,为深入研究甘蔗APX1在低温胁迫中的功能及为甘蔗抗寒育种的分子机理提供依据。以甘蔗叶片总RNA为模板,通过RT-PCR技术克隆甘蔗叶片ScAPX1的完整ORF序列,采用生物信息学软件分析所克隆基因的编码蛋白特性,并用荧光定量PCR分析该基因在2个抗寒性差异较大的甘蔗品种GT28和YL6低温胁迫下的表达模式。结果表明,克隆得到甘蔗ScAPX1(NCBI登录号为KC794939),其包含一个759 bp的完整开放阅读框,编码252个氨基酸。该基因编码的蛋白不含信号肽,为可溶性蛋白,无跨膜结构,定位于细胞质,与高粱氨基酸的同源性为98%,推测其为胞质型抗坏血酸过氧化物酶基因。qRT-PCR分析结果表明,随着低温(0-4℃)时间的延长,2个甘蔗品种ScAPX1的表达量均是先上升后下降,但表达量存在差异,在整个胁迫过程中,抗寒强品种GT28的表达量始终比抗寒弱品种YL6高。甘蔗ScAPX1积极响应低温逆境胁迫,该基因的诱导表达与甘蔗品种本身的抗寒性密切相关。

• 单位
  中国农业科学院; 广西大学; 广西壮族自治区农业科学院甘蔗研究所; 农业部; 广西林业科学研究院; 广西壮族自治区亚热带作物研究所