H5N1亚型禽流感病毒NS1蛋白表达影响因素分析

作者：李观强; 张志珍; 李国明

来源：中国热带医学, 2012, (01): 1-5.

DOI：10.13604/j.cnki.46-1064/r.2012.01.001

• 禽流感
• H5N1
• NS1融合蛋白
• 原核表达 Avian influenza
• H5N1
• NS1 fusion protein
• Prokaryotic expression

目的优化高表达禽流感病毒NS1蛋白的实验方法。方法将基因工程菌接种LB培养基,设定IPTG终浓度为0.3mmol/L,诱导温度为37℃,诱导表达6.0h,SDS-PAGE分析融合蛋白表达情况,确定最佳诱导时间。以0.1mmol/L为梯度,设置不同IPTG诱导浓度,37℃诱导4.0h,分析融合蛋白表达,确定最佳IPTG诱导浓度。设定IPTG至终浓度为0.6mmol/L,分别于24℃、28℃、32℃、37℃和42℃下诱导表达4.0h,分析融合蛋白表达,确定最适诱导温度。采用最优表达条件,超声裂菌后SDS-PAGE分析融合蛋白,Western blotting对融合蛋白进行鉴定。结果当培养温度为37...

• 单位
  深圳市龙岗区人民医院; 广东医科大学