摘要

目的 构建幽门螺杆菌 (Hp)中性粒细胞激活蛋白 (HP NAP)DNA疫苗。 方法 扩增全长napA(编码HP NAP) ,将其与克隆载体 pBT连接 ,经测序及同源性分析后 ,将相应片段亚克隆入真核表达载体pIRES ,经双酶切及PCR鉴定。 结果 PCR扩增一 4 35bp产物 ,核苷酸序列测定及BLAST分析表明 ,所克隆序列与基因库中Hp悉尼株 (SS1)napA核苷酸及蛋白质的同源性均为 98%。ANTHEPROT软件预测其蛋白质具有良好的疏水性和抗原性。经PCR及双酶切鉴定 ,证实成功构建携带napA的重组真核表达质粒 pIRES napA。结论 成功构建并鉴定了HP NAP重组DNA疫苗 ,为进一步研究其免疫原性及研制口服DNA疫苗奠定了基础。