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摘要
目的 通过慢病毒载体介导的NLRP3炎症小体在实验性类风湿性关节炎(RA)动物模型过表达，研究艾灸对实验性RA家兔滑膜组织分泌ASC、Caspase-1的影响及NLRP3炎症小体的调控机制。方法 日本大耳白兔30只，按体重、性别分层，随机分为空白对照组(简称对照组)、RA模型组(简称模型组)、艾灸治疗组(简称艾灸组)、艾灸治疗+NLRP3过表达组(简称NLRP3过表达组)、艾灸治疗+NLRP3过表达阴性对照组(简称NLRP3阴性对照组),每组6只。造模将弗氏完全佐剂(FCA)按0.5mL/kg体重剂量平均注入兔双后侧双膝关节腔内，对照组采用同样方法注入无菌生理盐水作为对照。造模后第3天，应用微量注射器将NLRP3过表达慢病毒载体40μL(滴度1.0×1011TU/ml),用生理盐水配置成0.34ml溶液，于髌韧带附近缓慢注入NLRP3过表达组兔双侧后膝关节腔内，NLRP3阴性对照组家兔同法注入等量LvGFP作阴性对照，艾炷灸艾灸组、NLRP3过表达组、NLRP3阴性对照组双侧“肾俞”“足三里”穴治疗实验性RA(5壮/穴/天，6天为1个疗程，共治疗3个疗程，疗程之间休息1天)。造模前及治疗后第3、6、9、12、15、18、21天分别测量各动物左右膝关节周长。治疗后第21天进行滑膜组织取材，运用采用RT-PCR检测NLRP3、ASC、Caspase-1 mRNA基因蛋白表达情况。结果 造模前，左、右膝关节周长各组间无显著性差异(P>0.1);模型组各个时间点左、右膝关节周长均较对照组明显增大(P<0.01);治疗后艾灸组左、右膝关节均较模型组减小(P<0.05);与艾灸组、NLRP3阴性对照组比较，NLRP3过表达组左、右膝关节周长显著增大(P<0.01);与艾灸组比较，NLRP3阴性对照组左、右膝关节周长无显著差异(P>0.05)。与对照组比较，模型组NLRP3、ASC、Caspase-1 mRNA含量极显著升高(P<0.01);与模型组比较，艾灸组NLRP3、ASC、Caspase-1 mRNA含量极显著降低(P<0.05);与艾灸组、NLRP3阴性对照组比较，NLRP3过表达组NLRP3、ASC、Caspase-1 mRNA含量极显著升高(P<0.01)。与艾灸组相比，NLRP3阴性对照组NLRP3、ASC、Caspase-1 mRNA基因表达值含量无显著差异(P>0.1),不具备统计学意义。结论 艾灸具有抗炎消肿作用，类风湿性关节炎滑膜组织炎症及关节功能障碍可能与关节滑膜组织中NLRP3炎症小体过度活化有关，艾灸“肾俞”“足三里”穴治疗RA可能与抑制ASC、Caspase-1的产生，抑制NLRP3炎症小体的过度活化有关，但在NLRP3炎症小体过表达的情况下其作用明显降低。
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