延边黄牛活体采卵体外受精胚胎程序化冷冻保存的研究

作者：孙敬宇; 史佳斌; 鄂志强; 高青山^*

来源：黑龙江畜牧兽医, 2021, (14): 54-59.

DOI：10.13881/j.cnki.hljxmsy.2021.01.0218

• 延边黄牛
• 囊胚
• 胚胎冷冻
• 程序化冷冻
• 冷冻保护剂
• 平衡时间

为了探究延边黄牛活体采卵体外受精胚胎程序化冷冻时,冷冻保护剂种类、浓度、平衡时间及囊胚不同发育阶段对冷冻效果的影响,试验以延边黄牛活体采卵体外受精胚胎为研究对象,设置4组试验:试验一,以甘油作为冷冻保护剂,设置冷冻液中甘油的浓度分别为0.5,1.0,1.5,2.0,2.5,3.0 mol/L,统计各浓度下冷冻胚胎(囊胚)的存活率和孵化率;试验二,以乙二醇作为冷冻保护剂,设置冷冻液中乙二醇的浓度分别为0.5,1.0,1.5,2.0,2.5,3.0 mol/L,统计各浓度下冷冻胚胎(囊胚)的存活率和孵化率;试验三,以上述最佳冷冻液的最适浓度作为冷冻条件,设置胚胎在冷冻液中平衡时间分别5,10,15,20,25 min,统计各平衡时间下的冷冻胚胎(囊胚)的存活率和孵化率;试验四,以上述最佳冷冻保护剂的最适浓度和最佳平衡时间为条件,选择第7天囊胚和扩张囊胚进行冷冻试验,统计不同发育时期的胚胎的存活率和孵化率。结果表明:以甘油作为冷冻保护剂,浓度为2.0 mol/L时冷冻延边黄牛活体采卵体外受精胚胎的存活率和孵化率最高;以乙二醇作为冷冻保护剂,浓度为1.5 mol/L时冷冻延边黄牛活体采卵体外受精胚胎的存活率和孵化率最高;对延边黄牛活体采卵体外受精胚胎程序化冷冻时,甘油(2.0 mol/L)与乙二醇(1.5 mol/L)为冷冻保护剂冷冻的胚胎存活率与孵化率两者之间差异不显著(P>0.05),但甘油的效果好于乙二醇;以甘油(2.0 mol/L)作为冷冻保护剂,平衡时间为15 min时冷冻胚胎的存活率和孵化率最高,且扩张囊胚的存活率[(68.69±3.50)%]及孵化率[(37.37±7.00)%]要高于囊胚的存活率[(60.74±5.60)%]及孵化率[(31.85±8.98)%]。说明当甘油浓度为2.0 mol/L、乙二醇浓度为1.5 mol/L时,均能有效地保护胚胎不受低温环境的影响,但以甘油作为冷冻保护剂效果更好;且扩张囊胚在甘油冷冻保护剂中平衡15 min冷冻效果较好。

• 单位
  延边大学