半滑舌鳎类胰岛素生长因子-Ⅰ的原核表达及活性分析

作者：刘芝亮; 徐永江; 柳学周; 史宝; 王妍妍

来源：中国水产科学, 2013, (04): 706-712.

DOI：10.3724/SP.J.1118.2013.00706

• 半滑舌鳎
• IGF-I
• 原核表达
• 生物活性 Cynoglossus semilaevis Güther
• IGF-I
• prokaryotic expression
• bioactivity

根据半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis Güther)类胰岛素生长因子-Ⅰ(IGF-I)基因的cDNA序列,设计引物扩增编码IGF-I成熟肽序列,此序列由210个碱基组成,包括B-C-A-D 4个功能域。利用PCR方法将扩增片段克隆到原核表达载体pET-28a上,得到重组质粒,将重组质粒导入到大肠杆菌BL21(DE3)后经IPTG诱导产生N端含6个组氨酸的融合蛋白。以SDS-PAGE电泳检测和SigmaScan软件分析获得的多肽,结果表明:IGF-I融合蛋白大小为11.4 kD,IPTG诱导3 h时目的蛋白表达量最高,占细菌总蛋白的58.5%,1 L菌液表达目的蛋白40.7...

• 单位
  生命学院; 上海海洋大学; 中国水产科学研究院黄海水产研究所; 农业部