摘要
目的探讨Six1对人支气管上皮细胞(16HBE)间质转化(EMT)及纤维化的影响。方法体外培养16HBE细胞株并分成3组,实验组转染Six1(NM005982)-GV146质粒,阴性对照组转染GV146对照质粒,空白对照组仅给予LipofectamineTM2000转染试剂。转染48 h后用倒置显微镜观察各组细胞形态的变化;采用RT-PCR及Western blot技术检测Six1、E-钙黏蛋白、α肌动蛋白、波形蛋白、纤维粘连蛋白、角蛋白的mRNA和蛋白表达。结果与阴性对照组及空白对照组比较,实验组细胞间隙增大、形态发生梭形改变;Six1、α肌动蛋白、波形蛋白、纤维粘连蛋白的mRNA及蛋白表达增高,差异有显著性(F=11.40~881.42,P<0.05);E-钙黏蛋白、角蛋白mRNA及蛋白表达明显降低,差异有显著性(F=10.71~20.37,P<0.05)。阴性对照组与空白对照组以上各mRNA及蛋白的表达比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 Six1过表达可使16HBE细胞发生EMT和纤维化改变。
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单位青岛大学附属医院